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在紫外线照射下,转基因克隆猪的四蹄呈荧光色。记者徐雁/摄
截至1月29日,云南农业大学动物科学技术学院的实验猪场里,经过近4个月妊娠期的4头代孕母猪,相继分娩出10头四蹄发出绿色荧光的猪宝宝。这是该校专家应用克隆和转基因技术,首次培育成功的表达绿色荧光蛋白及Leptin蛋白的转基因克隆猪,主持该项目研究的魏红江教授表示,这是该校继2010年初获得世界上第一头近交系克隆猪后,又一次填补我省在该研究领域的空白。该成果预示着转基因克隆技术在功能基因验证、疾病模型、异种器官移植等领域的应用前景更为广阔。
据魏红江介绍,该项研究从30日龄的猪胎儿皮肤细胞中分离出成纤维细胞,建立细胞系,然后将Leptin基因与水母绿色荧光蛋白的基因构建到同一个载体上,通过转染胎儿成纤维细胞,获得阳性的供体细胞,利用体细胞克隆技术构建转基因克隆胚,最后移植到代孕猪体内孕育生命。从去年9月29日至10月8日,研究人员先后分别向5头代孕母猪体内平均移植克隆胚胎398枚,其中有4头成功妊娠。今年1月17日以来相继分娩出14头仔猪,经分子检测鉴定,其中10头为表达绿色荧光蛋白及Leptin蛋白的转基因克隆猪。
据悉,该项成果运用分子生物学、体细胞转染、体细胞克隆、胚胎移植等技术,突破了常规育种所无法实现的跨物种基因转移。转入的绿色荧光蛋白基因,可作为重要标识来追踪转入基因的表达情况,存活的转基因克隆猪在紫外线照射下嘴唇、耳朵、四肢等部位可呈现出绿色荧光。Leptin又名瘦素、瘦蛋白抗肥胖因子等,具有促进脂肪分解和降低采食量的作用。转入Leptin基因的克隆猪在生长、繁殖、泌乳和生长性能方面发生的改变,将可用于建立脂肪沉积影响研究模型,用于人类肥胖病和糖尿病等疾病的研究。
历时一年半的该项研究,得到云南农大投入仪器设备等科研平台建设的支持,以及曾养志教授和高士争教授提供的科研成果支持。一次性成批量获得两种基因转入的小猪,其成功率居国内前列。目前,利用该项技术在版纳微型猪近交系进行的实验已展开。后续研究对于确认关键致命基因、制备生物反应器猪、建立各种人类重大疾病的动物模型、开展异种器官移植等领域的应用都具有非常重要的意义。